紫外分光光度計是一種將成分復雜的光，分解成光譜線的科學儀器，利用能產生多種波長的光源，通過一系列的分光裝置，從而產生特定波長的光，光通過被測樣品時，部分光被吸收，并計算出樣品的吸光度值，轉化為樣品的濃度。它已經成為現代分子生物學實驗室的常規儀器。它常用于核酸、蛋白質和細菌生長濃度的定量。

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　　由于參比溶液吸收一定量的光，通常需要在比色法測量前扣除這種吸收，以便更接近被測組分的吸收值，這樣就可以從校準曲線上計算出被測組分的濃度。紫外分光光度計在進行光度測量時，利用參比溶液來調整儀器的零點，可以消除由于吸收池壁和溶劑對入射光的反射和吸收而產生的誤差，并扣除干擾的影響。參考溶液的選擇可以根據以下條件進行。

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　　紫外分光光度計參比溶液的選擇

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　　1、溶劑

　　試樣成分簡單，共存的成分對測定的光的波長沒有吸收。

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　　2、試劑

　　色素或其他試劑對測定波長的吸收，按相同條件進行顯色反應，不需要加入試樣的試劑。

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　　3、試液

　　樣品基質溶液在測定波長處有吸收，顯色劑本身無色，可按與顯色反應相同的條件處理樣品，只是不加顯色劑。

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　　4、平行操作參考

　　用不含被測組分的試樣，在與被測樣品相同的條件下同時進行，得到平行操作參比溶液。

　　例如，在監測某種藥物濃度時，將正常人的血樣和待測血液濃度的血樣平行處理，前者得到的溶液可作為平行操作參比溶液。

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　　注意事項

　　1、試劑和顯色劑無色時，可采用蒸餾水作為參比溶液。

　　2、顯色劑有顏色時，可以選擇不加樣品的試劑空白溶液作為參比溶液。

　　3、顯色劑是無色的，而試液中存在其他有色離子時，可用不含顯色劑的試液作為參比溶液。

　　4、顯色劑與供試品溶液都有顏色時，可在供試品溶液中加入適當的掩蔽劑，將被測組分掩蔽起來，使之不再帶有顯色劑，而顯色劑和其他試劑則按供試品溶液的測定方法加入，作為參考溶液，這樣可消除顯色劑與某些共存組分的干擾。

　　5、改變試劑的加入順序，使被測組分不發生顏色反應，此溶液可作為消除干擾的參考溶液。

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