為什么當我們使用紫外分光光度計測量吸光度時讀數會不斷變化？是因為顯色反應還沒有完成還是其他原因？其實不然，儀器的靈敏度越高，吸光度值的漂移就越大。紫外分光光度計的設計原理和工作原理允許吸光度值在一定范圍內變化，儀器具有一定的準確度和精密度。

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　　1、樣品的稀釋濃度

　　樣品稀釋濃度也是一個不可忽視的因素，因為樣品中不可避免地存在一些細小顆粒，尤其是核酸樣品。這些小顆粒的存在會干擾測試結果。為了盡量減少顆粒對檢測結果的影響，要求核酸的吸光度值至少大于0.1A，最好在0.1-1.5A范圍內。在這個范圍內，粒子的干擾比較小，結果比較穩定。因此，這意味著樣品的濃度不能太低或太高（超出光度計的測試范圍）。

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　　2、核酸本身的理化性質

　　溶解核酸的緩沖液的pH值和離子濃度也會在測試過程中離子濃度過高導致讀數漂移，因此建議使用具有一定pH值和低離子濃度的緩沖液（如TE）可以大大穩定讀數。核酸的吸光度值受pH值和緩沖離子濃度的影響。只有在一定的pH和低離子濃度（如10mMTris-HClpH8.0）下才能得到準確的檢測結果。水的pH值不穩定，可能導致檢測錯誤。一些緩沖液在紫外范圍內有自己的吸收。為確保準確測量，請使用與懸浮或洗脫樣品時相同的緩沖液。

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　　3、紫外分光光度計操作因素

　　1)使用儀器前，用戶應先了解儀器的結構和工作原理，以及各操作旋鈕的作用。

　　2)儀器應放置在干燥的室內，使用時放置在堅固穩定的工作臺上，室內照明不宜過強。天氣炎熱時，請勿使用風扇直接對儀器吹氣，以免燈泡燈絲點亮不穩定。

　　3)按下電源前應檢查儀器的安全性能，電源接線要牢固，電源也要好，各調節旋鈕的起始位置要正確，然后按下電源開關.儀表未接通電源時，儀表指針必須在“0”線上，此時可用儀表上的校準螺絲調整。

　　4)如果大幅度改變測試波長，需要稍等片刻，等燈管熱平衡后，重新校準“0”和“100”點，再重新測量。

　　5)比色杯使用后，立即用蒸餾水沖洗干凈，并用干凈的軟紗布擦去水漬，以免損壞表面光潔度，影響比色杯的透光率。

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